光度计是由光源、单色器、吸收池、检测器和信号处理器等部件组成。是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。可以在紫外可见光区任意选择不同波长的光。物质的吸收光谱就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量,相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有各自不同的分子 、原子和不同的分子空间结构,其吸收光能量的情况也就不会相同,因此,每种物质就有其*的、固定的吸收光谱曲线,可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量。
光度计是实验室检测核酸或者蛋白样品浓度常用的工具之一。仪器使用频繁,但甚少见到有人维护。其实,保持光度计清洁、无污染是成功操作的关键。
光度计的使用方法:
1、接通电源,打开仪器开关,掀开样品室暗箱盖,预热10分钟。
2、将灵敏度开关调至"1"档(若零点调节器调不到"0"档时,需选用较高档。)
3、根据所需波长转动波长选择钮。
4、将空白液及测定液分别倒入比色杯3/4处,用擦镜纸擦清外壁,放入样品室内,使空白管对准光路。
5、在暗箱盖开启状态下调节零点调节器,使读数盘指针指向t=0处。
6、盖上暗箱盖,调节"100"调节器,使空白管的t=100,指针稳定后逐步拉出样品滑竿,分别读出测定管的光密度值,并记录。
7、比色完毕,关上电源,取出比色皿洗净,样品室用软布或软纸擦净。